反复种植失败(RIF)是辅助生殖中的常见挑战,涉及胚胎和子宫内膜因素。PGT-A技术通过筛查非整倍体胚胎,提高妊娠率,对于代生和代怀过程至关重要。选择优质的胚胎种子,结合专业代生咨询,能有效提升助孕成功率。

有的患者进行了多次IVF助孕,胚胎评分都还不错,但是总是种植失败。患者和医生都大伤脑筋。好的胚胎种子是种植成功的关键,但目前的胚胎挑选都是形态学评分标准。近年来,胚胎植入前非整倍体筛查(PGT-A)是否对反复助孕失败有益,引起了人们的关注和讨论。
反复种植失败(RIF)是指40岁的女性,重复IVF治疗超过3个移植周期,或累计移植4枚高评分胚胎,或2枚囊胚仍然不能怀孕者,但目前RIF的原因并不明确,还需进一步研究。患者一次次充满希望,又一次次失望,RIF是令医生和患者朋友都很沮丧的事情。RIF和复发性流产一样,至今仍然是个世界性难题,其原因复杂繁多,难以鉴别。因此RIF常被作为复发性流产的前序事件来描述,推测约50%以上的可能性为胚胎的非整倍体。
胚胎因素和子宫内膜因素为两个主要原因,类似于种子和土壤的关系。事实上,外观漂亮的并不一定就是优良种子,很可能是徒有其表而已,怎样才能挑出秀外慧中的真正良品呢?由此,胚胎植入前遗传学检测,筛查胚胎的非整倍体(PGT-A),被当作RIF胚胎挑选的候选工具被应用于临床,这对于代生和代怀过程非常重要。
PGT-A能解决RIF的哪些遗传学问题呢?
1、被遗漏的父母源性染色体小片段易位
随着高通量基因检测技术的飞速发展,基于芯片及测序的技术平台,对染色体检测的分辨率从10M到达0.5M,越来越多的对流产绒毛和胚胎细胞的遗传学诊断结果显示,一些父母源性的染色体小片段平衡易位是造成反复的妊娠丢失和种植失败的重要因素,而常规的染色体G显带核型检查不易发现。因此对RIF患者,可以通过对胚胎或囊胚的遗传学筛查,反推和发现原先不易诊断的亲源性的染色体重排异常,以证实部分RIF的发生原因。
2、非整倍体胚胎
一对夫妇每个月有25%的机会自然怀孕,其中50%的胚胎能够发育到足月,IVF胚胎中仅约有50%的染色体正常。高龄妇女约60%的胚胎为非整倍体,造成40%的自然流产率。年龄超过45岁时,胚胎的非整倍体率超过90%。研究表明,对RIF患者进行PGT-A检测后,其临床妊娠率可达到非RIF患者相近的水平(分别为68.3%和70.5%),而未进行PGT-A的RIF患者的临床妊娠率仅为21.2%。因此在国际共识和指南中,RIF作为进行PGT-A的指证之一,供卵机构常推荐此技术。
3、精子的染色体体异常
研究发现,严重少弱精男性精子染色体非整倍体的比例升高,目前还缺少精子非整倍体引发RIF的随机对照研究和回顾性分析,但是国内外指南已经将严重的少弱畸精子症列为PGT-A的指证。
4、非整倍体嵌合型胚胎
嵌合型胚胎是指同一胚胎含有2种及以上的细胞核型,国际PGD协会(PGDIS)的推荐界值是具有20%~80%非整倍体细胞的胚胎。在PGS的测序检测结果中,20%非整倍体细胞被判定为正常整倍体胚胎,80%非整倍体细胞被判定为异常非整倍体胚胎。通常认为人类嵌合型胚胎比例约30%,在不同年龄段类似。临床结果显示嵌合型胚胎移植后可生育正常后代,卵裂期嵌合型胚胎有很大的机会在继续培养过程中通过自我修复得以纠正。
由于胚胎滋养层细胞非整倍体嵌合型存在,采集5~6个细胞,常常不能代表整个滋养层300余个细胞的倍性,再加上测序平台的技术差异,对胚胎的发育和修复潜能是很难预估的。不排除我们可能丢弃了其实可以正常发育的胚胎。
5、染色体多态性变异
既往对于染色体的一些认为是多态性的变异,因为在正常生育力的人群中存在,所以不作为PGT的指证。近期的研究分析发现,在不孕症人群中一些染色体多态性变异的发生率增加,并伴随辅助生殖技术的妊娠率降低,提示这些变异可能与胚胎发育和着床有关。但是目前尚缺少染色体多态性变异导致不孕和种植失败的机制研究,也没有证据提示PGT-A可能使该类患者受益,需要进一步的临床观察和证据提供。
6、RIF做PGS的咨询
目前对于RIF的不孕夫妇,排除了其它一些显在的因素,在充分知情同意的情况下,可以进行PGT-A的咨询。对辅助生殖技术的并发症、PGT-A技术的局限性、嵌合型胚胎发生的比例和选择、精子非整倍体的可能、父母源性染色体潜在的缺陷、其它不明原因种植失败的原因等问题,需详细地解释和说明,代怀生子公司可以提供专业指导。
总之,胚胎因素是RIF的重要因素之一,选择高颜值发育潜力好秀外慧中的胚胎种子是很好的解决途径之一,PGT-A可作为胚胎挑选的有效方法,供卵代怀技术在此过程中发挥关键作用。
很多接受试管婴儿治疗的姐妹在取卵后都急于知道自己的胚胎情况,那我们什么时候可以知道自己的胚胎好不好呢?一般来说胚胎需要在培养室培养3-6天;胚胎师会在取卵后第一天进行受精评估,第三天对卵裂期胚胎进行评分,如果需要继续培养囊胚,则在第五天再次进行评分。
如果把胚胎评分比喻成考试的话,取卵后的第一天(D1)就是入学考试,第三天评分(D3)就是中考,第五天(D5)评分就是高考;有些中心还会对胚胎进行阶段性考试第二天(D2)胚胎评分。我们可以简单地将评分划两条线:及格线为可以利用的胚胎,也就是可以移植、冷冻、养囊的胚胎;而优秀线则是优质胚胎。
在试管婴儿技术发展最初期,胚胎的形态学等级一直被视作是决定临床妊娠率和活产率的重要因素之一。
就目前来说胚胎等级能帮助胚胎师判断哪些胚胎可以培养至囊胚,或哪些胚胎可以冷冻复苏。同时,如果是做一代或者二代试管婴儿的话,胚胎等级就是医生选择哪些可以优先植入的重要指标。
Day1:12~18小时后,观察卵子是否受精。
Day2:在37℃、5%CO2温箱中继续培养,观察受精卵发育为几个细胞(4细胞最佳)、是否有碎片(无碎片较好)、是否对称(对称较好)。
Day3:同第二天,观察受精卵发育为几个细胞(8-10细胞最佳)。
Day4:桑椹胚阶段
Day5:发育成上百个细胞,囊胚阶段
我们把第1~3天(D1~3)的胚胎称为卵裂期胚胎;而发育潜力好的胚胎到第5~6天(D5~6)就会发育成囊胚。我们一般选取第三天、第五天的胚胎进行评级。
第3天的胚胎报告卵裂期胚胎
细胞数:第三天胚胎至少要6个细胞,才能成为有效胚胎,但也偶有4或者5细胞的胚胎最终可以成活,一般情况下8细胞及以上可以被称为优胚,但还要看等级哦。
卵裂均匀程度及碎片:理论上,卵裂球进行一次分裂,胞质均匀等量分到两个子卵裂球中;如果不是均一分配,会出现卵裂球大小差异明显的现象。
在这个分裂过程中,产生的一些大小不一、胞质不均一的小小细胞(体积明显小于卵裂球),称之为碎片。碎片程度越小,胚胎发育潜能越好。
第三天胚胎分为3个等级:A级、B级、C级、D级或者用数字表示:如1级、2级、3级、4级。
所有的等级都是按样子分的,所以目前我们所谓的胚胎质量,就是胚胎长的好不好看。
A级(1级):胚胎卵裂球折光正常、大小均匀,外形规整,透明带完整,碎片量少于10%或者没有,是试管婴儿术中最理想的胚胎;
B级(2级):卵裂球折光性一般,大小不太均匀,碎片20%;
C级(3级):细胞团的大小和形状以及单个细胞的颜色和密度存在严重的不规则。至少有25%的细胞结构是完好的、具有活性的胚胎细胞团;
D级(4级):不能使用的胚胎,标志着胚胎死亡或者退化。退化的胚胎、卵母细胞或1细胞胚胎,没有活力。
一般来说胚胎A级和B级就是比较好的,C级也是可以用的,但效果不及A、B级的好,D级就比较差了,一般不会移植和冷冻使用。
整体而言,第三天8细胞C级的胚胎就是优质胚胎哦!
第5天的胚胎报告囊胚期期胚胎
与上面培养到第3天的卵裂期的评分方法不同,培养到第5天的囊胚主要是由囊胚腔、内细胞团、滋养外胚层组成。
内细胞团将来发育成胎儿,而滋养层细胞将来分化发育为胎盘,为胚胎的着床及后续发育提供营养。
根据囊胚腔的大小和是否孵化,将囊胚发育分为6个时期,1~2期的囊胚统称为早期囊胚(EB),3~6期的囊胚根据内细胞团和滋养层细胞分为A、B、C三个等级。
一般培养至第五或者第六天还处于1期或者2期的囊胚被称为早期囊胚,不符合冷冻要求,实验室一般不予冷冻,会再培养观察看看。
处于3至6期的囊胚才会对其内细胞团和滋养层细胞进行质量分级后具体评估。正常情况下,CC级以上的囊胚可以用来冷冻或者移植,DD级的囊胚一般会建议放弃。
在实际中,因为5、6级胚胎部分细胞已经从透明带溢出,在实际操作中反而不如4级的囊胚好。所以,第5天胚胎要数4AA的囊胚等级最高、质量最好哦!
等级越高、质量越好的胚胎移植后其怀孕率越高,同时需要注意的是不要看囊胚移植成功率高就盲目选择,要知道囊胚的培养条件比较高,不是适合所有情况,大家不必强求。
此外,即使外观最漂亮的胚胎也不能代表成功率一定100%。好看的胚胎着床率高一些,但不好看的也有很多最终发育成了健康的宝宝。
性激素六项的意义
1.FSH和LH:基础值为5~10IU/L
正常月经周期中,卵泡早期(月经2~3天)血FSH、LH均维持在低水平,排卵前迅速升高,LH高达基础值的3~8倍,可达160IU/L甚更高,而FSH只有基础值的2倍左右,很少﹥30IU/L,排卵后FSH、LH迅速回到卵泡期水平。
监测卵泡早期的FSH、LH水平,可以初步判断性腺轴功能。FSH在判断卵巢潜能方面比LH更有价值。
(1).卵巢功能衰竭:基础FSH﹥40IU/L、LH升高或﹥40IU/L,为高促性腺激素(Gn)闭经,即卵巢功能衰竭;如发生于40岁以前,称为卵巢早衰(POF)。
(2).基础FSH和LH均﹤5IU/L为低Gn闭经,提示下丘脑或垂体功能减退,而二者的区别需借助促性腺激素释放激素(GnRH)试验。
(3).卵巢储备功能不良(DOR):基础FSH/LH﹥2~3.6提示DOR(FSH可以在正常范围),是卵巢功能不良的早期表现,往往提示患者对超排卵(COH)反应不佳,应及时调整COH方案和Gn的剂量以提高卵巢的反应性,获得理想的妊娠率。
(4).基础FSH﹥12IU/L,下周期复查,连续﹥12IU/L提示DOR。具体卵巢储备功能的判断还需结合窦卵泡总数等指标。
(5).多囊卵巢综合征(PCOS):基础LH/FSH﹥2~3,可作为诊断PCOS的主要指标(基础LH水平﹥10IU/L即为升高,或LH维持正常水平,而基础FSH相对低水平,就形成了LH与FSH比值升高)。
(6).检查2次基础FSH>20IU/L,可认为是卵巢早衰隐匿期,提示1年后可能闭经。
2.P:基础值一般<1ng/ml
正常情况下,卵泡期血P一直在较低水平,平均0.6~1.9nmol/L,一般<10nmol/L(3.15ng/ml);排卵前出现LH峰时,P分泌量开始增加,排卵后卵巢黄体产生大量P,血P浓度迅速上升;黄体成熟时(LH峰后的6~8天),血P浓度达高峰,可达47.7~102.4nmol/L(15~32.2ng/ml)或更高,然后不断下降,月经前期达低水平。整个黄体中外周血的P含量变化呈抛物线状。
因此,孕酮水平可以用来判断排卵:黄体中期(月经周期28日的妇女为月经第21日)P>16nmol/L(5ng/ml)提示排卵,﹤16nmol/L(5ng/ml)提示无排卵。
3.E2:基础值为25~45pg/ml
正常月经周期中,卵泡早期E2约为183.5pmol/L(50pg/ml),排卵前达第一个高峰,可达917.5~1835pmol/L(250~500pg),排卵后迅速下降,黄体期形成第二个高峰,约458.8pmol/L(124.80pg),维持一段时间后,黄体萎缩时下降至早卵泡期水平,即来月经第3天应该为91.75~183.5pmol/ml(25~50pg/ml)。
(1).基础E2>165.2~293.6pmol/L(45~80pg/ml),无论年龄与FSH如何,均提示生育力下降。
(2).基础E2≥367pmol/L(100pg/ml)时,卵巢反应更差,即使FSH﹤15IU/L,也无妊娠可能。
(3).监测卵泡成熟和卵巢过度刺激综合征(OHSS)的指标
4.PRL
PRL由腺垂体嗜酸性的PRL细胞合成和分泌。PRL分泌不稳定,情绪、运动、性交、饥饿及进食均可影响其分泌状态,而且随月经周期有较小的波动,具有与睡眠有关的节律性;入睡后短期内PRL分泌增加,下午较上午升高。
因此,根据这种节律分泌特点,应在上午9~10时空腹抽血。
PRL显著升高者,一次检查即可确定;PRL轻度升高者,应进行第二次检查,不可轻易诊断高泌乳素血症(HPRL)而滥用溴隐亭治疗。
PRL≥25ng/ml或高于本单位检验正常值为HPRL。
PRL﹥50ng/ml,约20%有泌乳素瘤。
PRL﹥100ng/ml,约50%有泌乳素瘤,可选择性做垂体CT或磁共振。
PRL﹥200ng/ml,常存在微腺瘤,必须做垂体CT或磁共振。
PRL降低:席汉综合征、使用抗PRL药物如溴隐亭、左旋多巴、VitB6等。
5.睾酮COS患者T呈轻度到中度升高;卵巢或肾上腺有分泌雄激素的肿瘤及多毛症T升高。
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